血培養(yǎng)是臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室最重要檢查之一,是從患者體內(nèi)采血,并將其裝入含有培養(yǎng)基的瓶中,以此來(lái)確定導(dǎo)致患者感染的微生物(細(xì)菌或真菌)是否已經(jīng)侵入患者的血液。它是診斷血流感染、菌血癥的金標(biāo)準(zhǔn)。
想要獲取準(zhǔn)確的血培養(yǎng)結(jié)果,需要臨床醫(yī)生、護(hù)理人員和檢驗(yàn)科工作人員共同做好質(zhì)量控制。下面就提供一份詳細(xì)完整的關(guān)于血培養(yǎng)操作過(guò)程指南。
一:血培養(yǎng)的送檢指征是什么?
懷疑患者存在菌血癥、敗血癥等血流感染時(shí)必須送檢血培養(yǎng),其主要指征如下:
1.不明原因的發(fā)燒(>38.5℃)或體溫低于36 ℃
2.WBC增多( >10X109/L)或粒細(xì)胞減少
3.寒顫
4.血壓降低
5.嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、腎盂腎炎、腹部術(shù)后感染)
6.血小板減少,皮膚粘膜出血
7.炎癥反應(yīng)參數(shù)如C反應(yīng)蛋白、降鈣素原(PCT)、1,3-β-D-葡聚糖(G試驗(yàn))升高等。
最佳采集時(shí)間盡量在患者寒顫或發(fā)熱初期采血,盡可能在患者使用抗生素前完成采集。
二:采集幾套血培養(yǎng)合適?
1.成人在不同部位采集2-3套血培養(yǎng),(需氧、厭氧各一瓶為一套)。先注入需氧瓶,然后剩余的注入?yún)捬跗績(jī)?nèi)。
2.嬰幼兒在不同部位采集2套血培養(yǎng),(以提高病原菌檢出率和判斷有無(wú)污染菌,只需做需氧培養(yǎng),特殊情況才做厭氧培養(yǎng))。
注意:一次穿刺采血算一套,采集第二套應(yīng)從另外的穿刺點(diǎn)獲取。另外,由于抗生素開(kāi)始治療后,血液中的細(xì)菌并不能立即被清除,因此5天內(nèi)無(wú)需重復(fù)采集。
三:規(guī)范的血培養(yǎng)采集流程圖
血培養(yǎng)因采用無(wú)菌體液方法采集,宜單獨(dú)采集,若與其他檢測(cè)項(xiàng)目同時(shí)采集,應(yīng)先采血培養(yǎng)瓶,避免污染造成假陽(yáng)性情況。
成人采血量8-10ml/瓶,嬰幼兒1-5ml/瓶(嚴(yán)格無(wú)菌操作,不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈)。
血液注入血培養(yǎng)瓶后輕搖瓶身,做好標(biāo)記 → 立即送檢(切忌將培養(yǎng)瓶冷藏或冷凍)
四:關(guān)于血培養(yǎng)的采血量
1.采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵的因素。每瓶應(yīng)采血8~10ml,兒童患者因?yàn)檠褐胁≡鷿舛容^高,血培養(yǎng)量無(wú)需等同于成人,但也推薦采血量每瓶不少于2ml。
2.成人一份標(biāo)本兩個(gè)培養(yǎng)瓶(需氧+厭氧),每瓶8-10ml。
3.兒童一般只需采集需氧瓶,每瓶2-5ml。
根據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)每增加1ml血液,陽(yáng)性率提高3%-5%
五:血培養(yǎng)的孵育時(shí)間
1.CLSI推薦全自動(dòng)系統(tǒng)只需孵育5天。
2.90%的陽(yáng)性標(biāo)本可在12h內(nèi)被檢出,36h內(nèi)可檢測(cè)出99%的陽(yáng)性標(biāo)本。3-5天后陽(yáng)性者多為污染菌。即便致病菌和污染菌在培養(yǎng)時(shí)間上存在差異,但專(zhuān)家建議,血培養(yǎng)陽(yáng)性時(shí)間不應(yīng)作為鑒別污染菌和致病菌的標(biāo)準(zhǔn)。
3.與孵育7天相比,只有0.3%的陽(yáng)性血培養(yǎng)在5天內(nèi)不能被檢出。設(shè)定5天為孵育周期是最具有性價(jià)比的。
六:血培養(yǎng)的報(bào)告制度
微生物實(shí)驗(yàn)室針對(duì)血培養(yǎng)檢驗(yàn)結(jié)果周期較長(zhǎng),患兒病情變化快,專(zhuān)門(mén)制定了一套血培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告制度,目的就是為臨床及時(shí)提供有價(jià)值的信息。
1.連續(xù)三日初步無(wú)菌報(bào)告:每日通過(guò)系統(tǒng)發(fā)出連續(xù)三日培養(yǎng)結(jié)果陰性的報(bào)告。不作為正式報(bào)告,僅供臨床參考。
2.陽(yáng)性初報(bào)(報(bào)陽(yáng)第一天):電話通知具體管床醫(yī)生,告知患兒姓名,報(bào)陽(yáng)日期時(shí)間,革蘭氏染色特性。
3.陽(yáng)性初報(bào)(報(bào)陽(yáng)第二天):根據(jù)陽(yáng)性血培養(yǎng)轉(zhuǎn)種后生長(zhǎng)的菌落形態(tài)和染色及氧化酶和觸酶的結(jié)果,初步鑒定細(xì)菌的種屬,同時(shí)若有初步藥敏結(jié)果,先給臨床提供參考用藥。
4.正式報(bào)告(報(bào)陽(yáng)第三天):書(shū)面報(bào)告鑒定細(xì)菌的種屬結(jié)果和藥敏結(jié)果。同時(shí)每日匯總發(fā)出連續(xù)五日培養(yǎng)結(jié)果陰性的報(bào)告。
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